Тесты с цервикальной слизью сперматозоидов

Цервикальная жидкость, или цервикальная слизь (ЦС) - секрет, основу которого составляют сложные белки и углеводы. ЦС вырабатываясь железами цервикального канала, заполняет цервикальный канал и образует слизистую пористую пробку в шейке матки.

F​ Проникновение сперматозоида в ЦС – первый этап в женском организме на пути к оплодотворению яйцеклетки.

Свойства ЦС изменяются на протяжении менструального цикла под действием женских репродуктивных гомонов. В первую (фолликулярную) фазу цикла эстрогены стимулируют образование обильной цервикальной слизи, к моменту овуляции размер пор увеличивается и уменьшается вязкость слизи, что способствует прохождению сперматозоидов. В лютеиновую фазу цикла под действием прогестерона количество вырабатываемой слизи значительно снижается, а вязкость увеличивается.

ЦС выполняет важные функции:

-​ Барьерную – обладая бактерицидными свойствами, защищает полости матки от проникновения бактерий;

- Регулирует проникновение сперматозоидов, создавая условия для проникновения в полость матки в период овуляции и, наоборот, препятствует проникновению сперматозоидов в другие периоды менструального цикла;

- Является резервуаром сперматозоидов;

- Ограничивает проникновение в полость матки морфологически и функционально неполноценных сперматозоидов.

Нарушение качества цервикального секрета вызывают различные факторы: гормональный дисбаланс, использование контрацептивов, инфекционные и воспалительные заболевания, нарушение питания.

F​ Изучение свойств цервикальной слизи и особенностей проникновению вглубь нее сперматозоидов используется для диагностики фертильности супружеской пары.

Оценка свойств цервикальной слизи

-​ Оценка свойств цервикальной слизи проводится в баллах (по 3-ех бальной системе) на основе ее объема, консистенции, кристаллизации, растяжимости и клеточного состава.

F​ Максимальная сумма 15 баллов. Оценка выше 10 баллов обычно говорит о хорошем качестве цервикальной слизи, благоприятствующей проницаемости сперматозоидами, а ниже 10 - о неблагоприятном для зачатия качестве слизи.

- Данные о рН слизи не включаются в общую оценку, однако этот параметр следует измерять, так как он является важным фактором взаимодействия сперматозоидов с цервикальной слизью. Кислая реакция ЦС снижает подвижность сперматозоидов, щелочная поддерживает их подвижность. Оптимальные величины рН для выживаемости и миграции сперматозоидов в цервикальной слизи находятся в пределах 7,0-8,5, что соответствует середине менструального цикла и овуляции.

Кислая среда ЦС в середина цикла может быть следствием патологической секреции, либо наличия бактериальной инфекции.

Консистенция цервикальной слизи является самым важным из факторов, влияющих на пенетрацию сперматозоидов. В середине менструального цикла миграция сперматозоидов сквозь цервикальную слизь осуществляется без особого препятствия. «Вязкая» слизь в лютеиновую фазу создает барьер труднопроходимый для сперматозоидов. Клеточный детрит и лейкоциты в цервикальной слизи также затрудняют миграцию сперматозоидов. Показано, что выраженный эндоцервицит ассоциируется со сниженной фертильностью.

Кристаллизация - «Симптом папоротника» оценивается при исследовании под микроскопом мазка цервикальной слизи, высушенного на воздухе. При этом в препарате видны различные узоры кристаллов, которые похожи на листья папоротника. В зависимости от структуры слизи «листья папоротника» могут иметь только первичные стебли или разветвляться однократно, двукратно, троекратно, образуя вторичные, третичные и четвертичные стебли соответственно.

Кристаллизация ЦЖ до третичных и четвертичных стеблей, по виду напоминающая рисунок листьев папоротника, наблюдается в фолликулярной фазе, особенно во время овуляции. Растяжимость.Длину цервикальной слизи между исследуют между двумя стеклами и измеряют в сантиметрах.

Клеточный состав ЦС. Оценка содержания лейкоцитов и других типов клеток в цервикальной слизи традиционно основывается на числе клеток, подсчитанных в поле зрения при микроскопии с высоким увеличением, результаты подсчета выражаются в «клетках/мкл».

Взаимодействие сперматозоидов с цервикальной слизью

Цервикальная слизь способствует миграции сперматозоидов в ограниченный период менструального цикла. Насыщенная эстрогенами цервикальная слизь благоприятна для пенетрации сперматозоидов. Длительность благоприятного периода у разных женщин различна. Более того, этот период варьирует у одной и той же женщины от одного менструального цикла к другому. Следовательно, только после повторения тестов в нескольких циклах можно сделать заключение о наличии нарушения взаимодействия сперматозоидов с цервикальной слизью.

Тест in vivo (посткоитальный тест, проба Шуварского) проводится:

-​ ближе к моменту овуляции, определяемой на основании клинических критериев (т.е. обычной продолжительности цикла, базальной температуры, изменений цервикальной слизи, цитологии влагалища, определения уровня эстрогенов в сыворотке или моче и УЗИ яичников)

-​ через стандартный промежуток времени после коитуса от 9 до 24 часов.

-​ при половом воздержании в течение как минимум 2 дней, не следует пользоваться вагинальной смазкой во время полового сношения и принимать ванну и подмываться после.

-​ Исследуют два образца:

Образец выделений из влагалища исследуют для установления факта попадания сперматозоидов во влагалище.

Образец цервикальной слизи.

Подвижность сперматозоидов в цервикальной слизи классифицируется по следующим категориям:

а) поступательное движение;

b) непоступательное движение;

d) неподвижные сперматозоиды.

Наличие любого числа сперматозоидов с поступательным движением является наиболее важным показателем нормальной функции цервикальной слизи.

Интерпретация результатов.

-​ Наличие в слизи цервикального канала любого числа сперматозоидов с поступательным движением подвергает сомнению наличие «цервикального фактора», как возможной причины бесплодия, у данной пары.

-​ При отрицательном или патологическом результате посткоитального теста его следует повторить.

-​ Только неоднократно полученный отрицательный результат посткоитального теста в течение нескольких циклов при условии оптимального времени проведения может свидетельствовать о роли цервикального фактора, как возможной причины бесплодия.

Тесты in vitro (проба Курцрока-Мюллера)

Изучение взаимодействия сперматозоидов с цервикальной слизью можно провести и с помощью тестов пенетрации in vitro. Обычно эти тесты проводят в случае получения отрицательного результата посткоитального теста.

Тесты in vitro наиболее информативны при перекрестном тестировании с использованием донорских сперматозоидов или цервикальной слизи.

Для исследования используются:

-​ Образец эякулята, полученный после 2-5 дневного воздержания. Полученный материал должен быть использован в течение часа после разжижения эякулята;

- Образец цервикальной слизи, полученный в середину менструального цикла, ближе к моменту овуляции, определяемой на основании клинических критериев (т.е. обычной продолжительности цикла, базальной температуры, изменений цервикальной слизи, цитологии влагалища, определения уровня эстрогенов в сыворотке или моче и УЗИ яичников)

Интерпретация результатов.

- Сперматозоиды пенетрируют в слизь и более 90% из них имеют отчетливую прогрессивную подвижность (нормальный результат).

- Сперматозоиды пенетрируют в слизь, но большинство не продвигается дальше, чем на 500 мкм (т.е. около десяти длин сперматозоида) от поверхности соприкосновения эякулята со слизью (плохой результат).

- Сперматозоиды пенетрируют в слизь, но быстро теряют подвижность или их движения становятся «колебательными» (неблагоприятный результат, указывающий на присутствие антиспермальных антител).

-​ Пенетрация сперматозоидов в слизь не происходит, сперматозоиды скапливаются вдоль границы соприкосновения с цервикальной слизью (неблагоприятный результат).

При подготовке материала за основу взяты «Руководство ВОЗ по исследованию и обработке эякулята человека», пятое издание, «Бесплодный брак. Современные подходы к диагностике и лечению», под редакцией Т.Г Сухих, Т.А. Назаренко, изд. 2, дополненное.

Врач-лаборант высшей категории, канд. мед. наук Н.А.Липатова